生命科学领域研究中,通过western blot对微量蛋白和生物大分子的检测是至关重要的,western blot时常被成为是蛋白水平检验的金标准。
Western blot利用电泳分离蛋白质后将蛋白质转移到膜上,再利用抗体对其进行特异性检测。通过分析条带大小和显色信号获得目标蛋白质在所分析的细胞或组织样本表达情况的信息。因此,获得高质量的western blot实验结果离不开检测灵敏度高、质量稳定的ECL发光液。传统ECL发光液因为灵敏度不足(pg级别)难以捕捉到低丰度蛋白的微弱信号,需要通过增加上样量、增加抗体浓度等方式进行检测,而此种方式又面临着高成本和低信噪比的缺点。
爱布诺ECL发光液使用一种高灵敏的化学发光底物,可用于直接或间接检测辣根过氧化物酶 HRP 标记的抗体或核酸底物。ABroadKitTM ECL发光液与HRP一起孵育时会发出蓝光,可以通过X射线胶片或CCD成像仪进行检测。ABroadKitTM ECL发光液具有极高灵敏度和高信噪比,可以检测出准飞克级别的蛋白或核酸。ABroadKitTM ECL发光液使用简单,混合等量 ( 1 : 1 ) 溶液A和B即可使用。
爱布诺根据客户的不同需求,推出了多种灵敏度级别的ECL底物化学发光液:ECL高敏(中)发光液;ECL 超敏(强)发光液;ECL 极敏(极强)发光液。无论是常规蛋白检测还是极低丰度蛋白的检测需求,爱布诺ECL发光液都能够满足。
爱布诺相关产品:
使用说明
1.按常规 Western blot 操作进行,二抗孵育后,在进行最后一次洗涤时根据膜的大小(每 10cm² 膜混合 0.5 mL Solution A 和 0.5 mL Solution B),按照 Solution A: Solution B=1:1 比例配制发光检测工作液。
注:工作液现配现用,配制后室温放置数小时后灵敏度可能略有降低。
2. 用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上,使其均匀覆盖,室温孵育 2 min。
注:增加孵育时间不会增加灵敏度,有时还会导致条带曝光时显示异常。发光过程的本质是酶促反应,加入发光液过少同样不利反应进行,会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。
3. 用平头镊子夹持蛋白膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的发光液。将膜的蛋白面朝上并包裹于洁净保鲜膜内,轻轻赶出气泡。
4. 化学发光成像仪检测:将膜直接放置于化学发光成像仪载物台中,然后参考仪器的说明书进行信号检测。
注意事项
1.Solution A 和 Solution B 在吸取过程中必须要更换枪头,两种溶液相互污染后会导致逐渐失效,影响后续的使用效果;
2.各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效;
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
4.本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
上一篇:没有了
下一篇:没有了